甲型流感病毒荧光pcr法检测试剂盒客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取rna,设计并合成引物,完成荧光定量pcr实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
甲型流感病毒荧光pcr法检测试剂盒 产品详情
参数规格:
产品名称:甲型流感病毒荧光pcr法检测试剂盒
产品分类:荧光pcr法
货号:cp99100
产品规格:50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重pcr检测以及三重pcr检测试剂盒。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×pcr buffer
5μl dntp mix(2mm)
4μl引物1(10pm)
2μl引物2(10pm)
2μl taq酶(2u/μl)
1μl dna模板(50ng-1μg/μl)
1μl加ddh2o至50μl
视pcr仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置pcr仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃40s→58℃30s→72℃60s,循环30-35次,在72℃保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(hb)elisa检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物a应挥发,避免长时间打开盖子。底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取od值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物a、b液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
phospho-beta 2 adrenergic receptor (ser346) 磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-ar 抗体 阿尔莱特葡萄球菌
phospho-beta 2 adrenergic receptor (ser355 + ser356) 磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-ar抗体 地衣形芽孢杆菌
apod 载脂蛋白d抗体 米氏硫胺素芽孢杆菌
asic1/bnac2/asic1a 酸敏感离子通道1抗体 溶酪葡萄球菌
adar1 (c-terminus) 双链rna腺苷酸脱氨基酶抗体(c端) 调料葡萄球菌
af10 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体 法氏柠檬酸杆菌
adcy1 腺苷酸环化酶1抗体 发酵乳杆菌
apc 腺瘤样息肉抗体 抗辐射不动杆菌
agpat1 溶血磷脂酰基转移酶抗体 巴氏葡萄球菌
anks3 锚蛋白重复及sam结构域蛋白3抗体 海滨芽孢杆菌
phospho-alk (tyr1586) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 类芽孢杆菌
acadvl 酰基辅酶a脱氢酶很长链抗体 短小芽孢杆菌
amsh 信号转导衔接结合蛋白抗体 肉葡萄球菌
asb3 锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体 粟褐芽孢杆菌
aurora c 有丝分裂激酶b抗体 沙门氏菌iv
phospho-ack1 (tyr284) 磷酸化ack1抗体 熏衣草灰链霉菌
phospho-ack1 (tyr326) 磷酸化ack1抗体 浅灰链霉菌杭州变种
phospho-beta-arrestin 1 (ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗体 刺孢吸水链霉菌北京变种
phospho-aurora a (thr288) 磷酸化有丝分裂激酶a抗体 吸水链霉菌应城变种山羊血管紧张素ⅱ(ang-ⅱ)elisakit goatangiotensionⅱ,ang-ⅱelisakit
山羊血管紧张素ⅰ(ang-ⅰ)elisakit goatangiotensionⅰ,ang-ⅰelisakit
山羊褪黑素(mt)elisakit goatmelatonin,mtelisakit
山羊铜蓝蛋白(cp)elisakit goatceruloplasmin,cpelisakit
山羊瘦素(lep)elisakit goatleptin,lepelisakit
山羊生长激素(gh)elisakit goatgrowthhormone,ghelisakit
山羊腺原氨酸(t3)elisakit goattri-iodothyronine,t3elisakit
山羊热休克蛋白70(hsp-70)elisakit goatheatshockprotein70,hsp-70elisakit
山羊醛固酮(ald)elisakit goataldosterone,aldelisakit
山羊前列腺素内过氧化物合酶1(前列腺素g/h合酶和环氧合酶)(ptgs1)elisakit goatptgs1elisakit
山羊前列腺素g/h合酶2(ptgs2)elisakit goatprostaglanding/hsynthase2,ptgs2elisakit
山羊前列腺素e2(pge2)elisakit goatprostaglandine2,pge2elisakit
山羊皮质醇(cortisol)elisakit goatcortisolelisakit
山羊脑啡肽(enk)elisakit goatenkephalin,enkelisakit
山羊免疫球蛋白m(igm)elisakit goatimmunoglobulinm,igmelisakit
山羊免疫球蛋白g(igg)elisakit goatimmunoglobuling,iggelisakit
山羊免疫球蛋白a(iga)elisakit goatimmunoglobulina,igaelisakit
甲型流感病毒荧光pcr法检测试剂盒山羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)elisakit goatgranulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor,gm-csfelisakit
山羊口蹄疫抗体(fmdvigm)elisakit goatantibodyagainstfootandmouthdisease(fmdv)igmelisakit
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10e2-10e7 拷贝/μl 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μl 荧光 pcr 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μl 阳性对照(浓度为 1×10e8 拷贝/μl,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10e7 拷贝/μl 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μl 1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10e6 拷贝/μl 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μl 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10e5 拷贝/μl 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 dna 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 dna,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 n 个样品,则需要进行 n+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qpcr 反应(20μl 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 n+9 个 pcr 管,其中 n+2 个用于上步得到的 n+2 个样品,1 个用于 pcr 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 n+4 个 pcr 管,其中 n+2 个用于上步得到的 n+2 个样品,1 个用于 pcr 阴性对照(用水做模板),1 个用于pcr 阳性对照。